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黄酮类

  自然药化黄酮类化合物总结_临床医学_医药卫生_专业材料。黄酮类化合物 Flavonoids 本章实质 组织与分类 理化本质 提取与别离 检识与组织判决 研习条件 1.掌管黄酮类化合物的厉重组织类型, 了然组织之间的生物合成闭连; 2.掌管黄酮类化

  黄酮类化合物 Flavonoids 本章实质 组织与分类 理化本质 提取与别离 检识与组织判决 研习条件 1.掌管黄酮类化合物的厉重组织类型, 了然组织之间的生物合成闭连; 2.掌管黄酮类化合物的理化本质和显色 反响; 3.掌管黄酮类化合物的提取别离举措; 4.掌管波谱法正在黄酮类化合物组织判决 中的运用,熟谙其色谱判决举措。 概述 黄酮类化合物概述 经典界说:根本母核为2-苯基色原酮的一类化合物 现正在界说:泛指两个苯环(A与B环)通过三个碳原子彼此 维系而成的一系列化合物 母 核 : 9(8a) 10(4a) 生源途径:莽草酸和乙酸-丙二酸复合途径 5 黄酮类化合物概述 黄酮类化合物是一类紧张的含氧杂环自然有机化合物 。 ? 分散广博:上等植物中常睹 ? 存正在地势:苷元、苷 ? 活性众样:抗氧化、血汗管、珍惜肝脏、抗炎、 抗癌、雌激素感化等 6 黄酮类化合物生物合成的根本途径 生源: 由三个丙二酸单酰辅酶A和一个桂皮酰 辅酶A生物合成而成. COCoA O COOH 3 X CH2COCoA A C B 桂皮酰辅酶A 丙二酰辅酶A 黄酮类化合物的组织和分类 分类尺度 a.中间三碳链的氧化水平 b.B-环联接地位(2-或3-位 ) c.三碳链是否组成环状 8 组织分类 黄酮类 Flavone O 异黄酮类 高异黄酮 查耳酮 二氢查耳酮 O 黄酮醇类 二氢黄酮 类 二氢黄酮 醇类 O O OH O OH O 组织分类 黄烷-3,4二醇类 O OH OH 黄烷-3-醇 类 O OH 花色素 O + 橙酮 O CH O 黄酮类化合物的组织和分类 黄酮类 flavones 黄酮 黄酮醇 黄酮醇类 flavonols 木犀草素,抗菌感化 槲皮素:R = H 芦 丁:R = 芸香糖 最常睹的黄酮醇类化合物 黄芩苷,清热解毒 11 黄酮类化合物的组织和分类 二氢黄酮类 flavanones 二氢黄酮 二氢黄酮醇 二氢黄酮醇类flavanonols 橙皮苷 Vpp样感化 水飞蓟素 甘草素 对溃疡有胁制感化 12 保肝感化 黄酮类化合物的组织和分类 异黄酮类 isoflavones 异黄酮 二氢异黄酮 二氢异黄酮类isoflavanones 鱼藤酮 农业杀虫剂 13 大豆异黄酮 黄酮类化合物的组织和分类 chalcones 高异黄酮类 homoisoflavonoids 查耳酮类 与异黄酮比拟:C环与B环间众了 1个CH2 黄酮类化合物的组织和分类 二氢查耳酮 花色素类anthocyanidins 矢车菊素:R1 = OH, R2 = H 飞燕草素:R1 = R2 = OH 天竺葵素:R1 = R2 = H 锦葵花素:R1 = R2 = OCH3 黄酮类化合物的组织和分类 黄烷醇类 苯骈色原酮类xanthones 黄烷-3-醇 R=H 黄烷-3,4-二醇 R = OH 儿茶素:抗癌活性 异芒果苷:止咳祛痰 芒果叶和知母叶 麻黄宁A/B:抗癌活性 16 黄酮类化合物的组织和分类 橙酮类 aurones 双黄酮类biflavonoids C环为含氧五元环较少睹 黄花波斯菊花:硫黄菊素 裸子植物:银杏、卷柏 17 黄酮类化合物的存正在地势 黄酮苷元 庖代基:OH,OMe,Me,异戊烯基等 黄酮苷 氧苷和碳苷 18 黄酮类化合物的组织和分类 庖代基 庖代基: -OH, -OMe, -Me, 庖代地位次序 庖代基 -OH, -OMe A环 5, 7位 B环 3’, 4’位 以及各式糖等 -Me, 6, 8位 3’位 19 黄酮类化合物的组织和分类 黄酮苷 自然黄酮类化合物众以苷类地势存正在。因为糖 的品种、数目、联接地位及联接体例分歧,构成 各式各样的黄酮苷。 构成苷类的糖有: 单糖:D-glc、D-gal、D-xyl、L-rha、L-ara、 D-glucuronic acid 双糖:槐糖(glcβ 1- 2glc), 芸香糖 (rhaα1-6glc)等。 三糖:龙胆三糖(glc β1-6glc β 1 –2 fru) 槐三糖(glc β1-2 glc β1-2glc) 20 第二节 黄酮类化合物的理化性 质与显色反响 一、性状 1、苷元众呈晶形,苷类为无定形粉末; 2、颜色:众为黄色,与组织中的交叉共 轭系统和助色团(-OH、-OCH3等)的 品种、数目及庖代地位相闭 .. HO O O 黄酮类化合物的理化本质 颜 色: 黄酮(醇)及其苷:呈黄色-灰黄色 性状 查耳酮:黄-橙色 二氢黄酮(醇):无色 异黄酮:微黄色 花色素可跟着pH值的转移颜色有所分歧: pH7 显血色;pH=8.5 显紫色; pH8.5 显兰色。 23 黄酮类化合物的理化本质 旋光性 逛离苷元: 二氢黄酮(醇)、黄烷(醇)有旋光性 其余黄酮类化合物无旋光性。 苷 类: 由于糖分子的引入,具有旋光性, 且众为左旋。 24 黄酮类化合物的理化本质 消融性 苷元: 难溶或不溶于水,可溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、等有 机溶剂。 苷: 可溶于水、乙醇、甲醇中,难溶于苯和氯仿,连糖越众,水 溶度越大 黄酮(醇),查尔酮:平面型分子 二氢黄酮(醇),异黄酮:非平面型分子 花色素:离子,具盐的通性 水 中 溶 解 度 增 加 25 黄酮类化合物的理化本质 酸性 酸性: 酚羟基 可溶于碱水、吡啶、DMF中 酸性强弱取决于羟基数目和地位 7 、4’-二OH 7-或4’-OH 大凡酚OH 5-OH 3-OH 运用: 提取、别离和判决中 O HO 7 OH O OH O 26 OH 4 O OH 黄酮类化合物的理化本质 碱性 碱性 泉源:γ-吡喃酮环上的1-位氧原子未共用 yang盐。 黄酮类 浓H2SO4 / 浓 HCl H 2O 盐 了解 黄酮类 27 黄酮类化合物的理化本质 显色反响 (一)还原反响 (二)金属盐类试剂络合反响 (三)硼酸显色反响 (四)碱性试剂显色反响 黄酮类化合物的理化本质 还原反响 HCl-Mg反响 盐酸镁粉反响 含黄酮(醇)、二氢黄酮(醇) (+)橙血色-紫血色 查耳酮、橙酮、黄烷(醇)类 (-)不显色 操作举措:1ml 样品 + Mg粉 + 几滴浓HCl 花色素及局限橙酮、查耳酮正在浓盐酸中会变色,故需 做比较 29 黄酮类化合物的理化本质 还原反响 HCl-Zn反响 二氢黄酮醇、黄酮醇-3-O-糖苷 (+)红~紫色 二氢黄酮醇-3-O-糖苷 、黄酮醇 (-)不显色 四氢硼钠(NaBH4)反响 二氢黄酮类化合物的专属性还原剂 (+)紫-紫红 色 30 黄酮类化合物的理化本质 显色反响 (一)还原反响 (二)金属盐类试剂络合反响 (三)硼酸显色反响 (四)碱性试剂显色反响 金属盐类试剂络合反响 ? 反响官能团:3-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O 邻二酚羟基 OH O OH OH OH O 金属盐类试剂络合反响 ? 铝盐反响 —— 三氯化铝反响 与1%AlCl3反响显 黄色或黄色加深,UV下荧光巩固 O O O O O O O Al Cl2 O Al Cl2 O Al Cl O ? 镁盐反响 —— 醋酸镁反响 二氢黄酮、二氢黄酮醇 ——— 天蓝色荧光 其他黄酮类 ——— 黄色~橙黄~褐色 金属盐类试剂络合反响 ? 铅盐反响 —— 醋酸铅反响 与1%醋酸铅或碱式醋酸铅,可天生 黄~血色浸淀 ? 醋酸铅: 邻二酚羟基,或兼有3-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O ? 碱式醋酸铅:大凡酚羟基类 金属盐类试剂络合反响 ? 锆盐反响 ——锆盐-枸橼酸反响 3-OH,4-C=O 5-OH,4-C=O 安闲,不退色 担心闲了解, 明显褪色 OH HO O OH O OH O H2O Zr O Cl + 2%ZrOCl2 黄色 H+ 金属盐类试剂络合反响 ? 氯化锶反响 邻二酚羟基 SrCl2 OHOH 绿色~棕色~玄色浸淀 O Sr O Sr++ 2HO- + H 2O OH ? 三氯化铁反响 酚羟基 FeCl3 绿色~茶青~玄色浸淀 正在黄酮类化合物中含有氢键缔合的酚羟基时颜色才明明 显色反响 (一)还原反响 (二)金属盐类试剂络合反响 (三)硼酸显色反响 (四)碱性试剂显色反响 硼酸显色反响 ? 硼酸络合反响 O O B O O H3BO4 OH O 亮黄色 O H+ O 5-OH-黄酮 6’-OH-查儿酮 样品 硼酸 黄色,无荧光 显色反响 (一)还原反响 (二)金属盐类试剂络合反响 (三)硼酸显色反响 (四)碱性试剂显色反响 碱性试剂显色反响 OH- 日光下显黄色或黄色加深 ? 黄酮类 UV下显荧光或荧光巩固 气氛 NaOH惹起的色变不退 NH4OH惹起的色变退去 ? 二氢黄酮类 OH- 显橙~黄色 OH- ? 黄酮醇类 呈黄色 气氛 棕色 OH HO O OCH3 OH HOH+ HO OH OCH3 OH O OH O HO O OH OH OH O HO O OH A OH HO OH OH O B OH O HO O O HO O C OH OH HO OH O D O OH OH OH OH O E OH HO O O F OH 用化学举措鉴识A-G O G 小结1 ——概述 ? 观念:C6-C3-C6 、 2-苯基色原酮 ? 组织类型: 划分按照:C环氧化水平、是否开环、B环维系地位 紧张类型:黄(醇)、二氢黄(醇)、(二氢)异黄 查尔酮、橙酮 ? 生物合成: B环的泉源:桂皮酸 A环的泉源 :丙二酸 ? 生物活性: 厉重活性及代外物 小结2 ——理化本质 一、性状: ? 颜色:众黄色 影响颜色深浅的厉重要素:交叉共轭系统 助色团及其地位。 ? 物态:众结晶、无定型粉末 二、消融性:苷与苷元的区别 影响苷元水溶性的要素: 三、酸性:泉源 影响要素及次序:7,4 7/4 大凡 5 四、碱性:1-O孤对电子 小结2 ——理化本质 三、显色反响: ? 还原反响:Mg-HCl反响:(二氢)黄(醇)—— 橙红-紫红-紫-蓝 NaBH4反响:二氢黄———————— 红-紫 ? 金属盐络合反响:AlCl3反响: 黄色荧光 Mg(Ac)2反响:二氢黄酮(醇) —— 天蓝色荧光 Pb(Ac)2反响:中性:邻二酚羟 —— 黄-血色浸淀 碱式: 锆盐-枸橼酸反响:3-OH,4C=O 5-OH,4C=O 黄色不退 黄色退去 氨性SrCl2反响:邻二酚羟 —— 绿-玄色 FeCl3反响:酚羟基 ——绿-玄色 小结2 ——理化本质 三、显色反响: ? 硼酸络合反响: ? 碱性试剂显色反响: 黄酮类 —— 日光下颜色加深,紫外下荧光巩固 二氢黄酮 —— 橙-黄色 黄酮醇—— 黄色,通气氛变棕色 5-OH黄酮、2-OH查尔酮 —— 亮黄色 第三节 黄酮类化合物的提取与 别离 黄酮类化合物的提取和别离 提取 道理:黄酮类化合物的消融性和酸性 相像相溶与酸碱外面 提取: 苷元:极性小的溶剂,如氯仿、、乙酸乙酯等 回流提取 苷及极性大的苷元: 用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加热提取 极性稍大的甙元大凡指:羟基黄酮、双黄酮、 橙酮、查尔 酮 众糖苷类:大凡用滚水提取 47 黄酮类化合物的提取和别离 粗分 ?溶剂萃取法(体系别离法) ?碱提酸浸法 ?炭粉吸附法 48 黄酮类化合物的提取和别离 溶剂萃取法 道理: 应用黄酮类与其它杂质极性 分歧,选分歧溶剂实行萃取 药 材 水或醇-水,加热提取 提取液 浓缩,加3-4倍醇 醇水液 浸淀(水杂) 浓缩,接受醇,加水 水 液 依序用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取 石油醚层 叶绿素等脂 溶性因素 氯仿层 黄酮苷元 乙酸乙酯层 大极性苷元 小极性的苷 正丁醇层 黄酮苷 水层 众糖 卵白质 49 黄酮类化合物的提取和别离 碱提酸浸法 ? 道理:酚羟基与碱成盐,溶于水;加酸后析出 ? 碱: 常用Ca(OH)2,即石灰乳(石灰水) ? 甜头 A:使含酚羟基化合物成盐消融 B:使含羧基杂质(果胶、粘液质、卵白质等) 酿成浸淀 ? 留意 a:提取时,碱液浓度不宜过高。 b:加酸酸化时,酸性也不宜过强。 ? 运用:芦丁和槲皮素的提取、别离和判决 50 51 黄酮类化合物的提取和别离 活性炭吸附法 道理:活性炭吸附黄酮苷类化合物 用处:厉重用于含量较高的黄酮苷类的精制 操作:植物的甲醇提取物中,分次到场活性炭, 搅拌,静置,定性反省上清液无黄酮反适时为止。 过滤,搜聚活性炭,依序用滚水、沸甲醇、7%酚/水、 15%酚/醇溶剂实行梯度洗脱,对各局限洗脱液实行定 性反省。 大局限黄酮苷类可能用7%酚/水洗下。 52 黄酮类化合物的提取和别离 硅胶柱色谱 硅胶是一种高活性吸附质料,其化学分子式为mSiO2· nH2O 运用局限: 厉重别离小极性和中等极性的化合物,运用最为广博。 异黄酮、二氢黄酮(醇)、高度甲基化(乙酰化)的黄 酮及黄酮醇 众羟基黄酮、黄酮醇及其苷类:硅胶加水去活化 吸附次序: 极性大吸附才能强 e g : A 苷元 B 二糖苷 C 单糖苷 53 Rf:A C B 黄酮类化合物的提取和别离 道理:氢键吸附(感化) 洗脱次序:(先—后) ? 母核上酚羟基推广,洗脱规律递减 聚酰胺柱色谱 ? 酚羟基数目相像时,有缔合羟基 无缔合羟基 ? 苷元相像:三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元 ? 分歧类型黄酮类化合物的洗脱先后规律为: 异黄酮>二氢黄酮醇>黄酮>黄酮醇。 ? 分子中浓郁水平高、共轭双键众,则聚酰胺对其的吸附力 强,故难于洗脱。 运用局限:适合各品种型的黄酮类化合物,包罗苷、苷元、 查耳酮及二氢黄酮 54 黄酮类化合物的提取和别离 葡聚糖凝胶柱色谱 ? 常用型号:Sephadex-G和Sephadex-LH20 ? 道理:吸附感化和分子筛 对逛离黄酮,厉重是吸附感化, 吸附水平取决于逛离酚羟 基的数目,苷元的羟基数目越众,越难洗脱。 对黄酮苷,厉重是分子筛道理, 洗脱时按分子量由大到小 先后洗脱下来。 ? 常用洗脱剂: 碱性水溶液(0.1mol/L NH4OH),盐水溶液(0.05mol/L NaCl) 醇及含水醇,如甲醇,甲醇-水,乙醇等。 其它溶剂:含水丙酮、甲醇-氯仿(凝胶会膨胀, 体积变大) 。 55 黄酮类化合物的提取和别离 梯度pH萃取法 道理: 黄酮类化合物具有酸性、且分歧数目和分歧地位的 酚羟基的酸性强弱分歧 合用局限:合用于别离酸性强弱分歧的黄酮苷元 酸性:7,4′-OH> 7-或4′-OH >大凡酚OH>5-OH 溶于5%NaHCO3 溶于5%NaCO3 溶于分歧浓度NaOH 56 黄酮类化合物的提取和别离 梯度pH萃取法 液 5% NaHCO3 液 碱液(7,4’-二OH黄酮) 5% Na2CO3 液 碱液(7或4’-OH黄酮) 0.2% NaOH 液 4% NaOH 液 (脂杂) 碱液(3或5-OH黄酮) 碱液(大凡酚OH黄酮) 57 黄酮类化合物的提取和别离 金属盐络合法 道理:应用分子中某些特定官能团本质实行别离 具有邻二酚羟基的因素,用醋酸铅浸淀 不具有邻二酚羟基的因素,用碱式醋酸铅浸淀 具有邻二酚羟基的黄酮类化合物还可能与硼酸反响酿成 溶于水的硼酸络合物,可能与不具有邻二酚羟基的其它 黄酮类化合物别离 58 提取别离举措实例 1.黄芩苷的提取别离举措 COOH O O OH OH HO OH O O 黄芩粗粉 OH 阔别加10倍、8倍量滚水煎煮两次, 每次1小时,过滤 药渣 滤液 加盐酸调pH1~2, 80 ℃ 保温30min 静置,离心浸淀 浸淀 依序用水、50%EtOH洗涤 95%EtOH重结晶 黄芩苷 滤液 提取别离举措实例 2.芦丁的提取举措 槐花米粗粉 HO O O OH O OH OH glc O rha 加6倍量水和适量的硼砂,煮沸 趁热抽滤 药渣 边搅拌边到场石灰乳至pH8~9,微沸 滤液 正在60~70 ℃要求下,加浓盐酸调至pH5,静置 抽滤 滤液 浸淀(芦丁粗品) 第四节 黄酮类化合物的 检识与组织判决 检识与组织判决 色谱法 紫外及可睹光谱 氢核磁共振谱 碳核磁共振谱 质谱 黄酮类化合物的检识 理化检识 颜色:众呈黄色 母核检识: 盐酸-镁粉反响 黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇 四氢硼钠反响 二氢黄酮(醇)类 庖代基团检识:锆盐-枸橼酸反响 3-OH、 5-OH黄酮鉴识 氨性氯化锶反响 邻二酚羟基 色谱检识: 硅胶 TLC 聚酰胺TLC 纸层析(PC) 63 黄酮类化合物的检识和组织判决 色谱法 硅胶TLC: 用于说明与判决弱极性黄酮类化合物。 张开剂:甲苯-甲酸甲酯-甲酸(5:4:1),苯-甲醇, 氯仿-甲醇等。 聚酰胺TLC: 适合于含逛离酚OH的黄酮及其苷类的说明。 聚酰胺对黄酮类化合物吸附才能强,大无数展 开剂中含有醇、酸或水。 纸色谱(PC): 合用于各式黄酮类化合物及其苷类的说明 64 双向纸层析 第从来:醇性溶剂张开,比如BAW体系,化 合物极性大,吸附强。 第二向:水类溶剂张开,比如2-6%醋酸水, 化合物极性大,吸附弱。 黄酮类化合物的检识和组织判决 纸色谱 层析反省举措: ①巡视荧光,用紫外光灯映照看到有色黑点,NH3惩罚 形成明明的色变。 ②用2%AlCl3甲醇液喷雾,UV灯下呈亮黄色荧光黑点。 66 二、紫外及可睹光谱法 带Ⅱ(240-280 nm) 由苯甲酰基体系惹起 反响A环庖代情形 带Ⅰ(300-400nm)由 桂皮酰基体系惹起反响 B环庖代情形 (一)正在甲醇溶液中的紫外光谱 1、黄酮、黄酮醇: 相像点:带I与带II的吸 收峰强度均较大; 分歧点:带I地位分歧 黄酮带I(304~350nm) 黄酮醇带I(358~385nm) a. b. 木犀草素和槲皮素正在甲醇溶液中的UV光谱数据 OH HO O OH HO OH O OH OH OH O 木犀草素 OH O 槲皮素 MeOH 253 (带II) 349 (带I) MeOH 256 (带II) 371(带I) (一)正在甲醇溶液中的紫外光谱 2、异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇 : 相像点:具有强的带II吸取,带I很弱, 常为肩峰。 分歧点:异黄酮带II(245~270nm) 二氢黄酮(醇)带II(270~295nm) 270-295nm 245-270nm 异黄酮和二氢黄酮正在甲醇溶液中的UV光谱 HO O O 7-羟基异黄酮 HO O OH O 200 300 400 500 4`,7-二羟基二氢黄酮 总结 异黄酮 二氢黄酮 黄酮 黄酮醇 查耳酮 橙酮 200 300 400 (nm) (一)正在甲醇溶液中的紫外光谱 3、查耳酮及橙酮类: 相像点:带Ⅰ很强,为主峰;带Ⅱ较弱, 为次强峰。 分歧点:橙酮常出现3~4个吸取峰, 查耳酮和橙酮正在甲醇溶液中的UV光谱 HO OH OH OH 340~390nm O 2,3,4—三羟基查耳酮 OH O CH OH 370~430nm 200 300 400 500 O 3`,4`--二羟基橙酮 黄酮类化合物组织判决 大凡步调: 1 待测样品正在甲醇中的UV光谱 2 待测样品正在甲醇中到场各式诊断试剂后的UV光谱 UV 诊断试剂:NaOCH3 ,NaOAc, NaOAc/H3BO3, AlCl3, AlCl3/HCl 3 苷类水解后的UV光谱。 75 诊断试剂正在组织测定中的运用 常用的诊断试剂: 甲醇钠(NaOCH3) 醋酸钠(NaOCOCH3) 醋酸钠/硼酸(NaOCOCH3/H3BO3) 三氯化铝(AlCl3) 三氯化铝/盐酸(AlCl3/HCl) 76 诊断试剂正在组织测定中的运用 1. NaOMe:确定4’-OH 碱性强,黄酮类化合物整个酚OH,均可正在NaOMe 中成钠盐,惹起 红移。 77 诊断试剂正在组织测定中的运用 2. NaOAc:确定7-OH 未熔融: 含有微量的HOAc, 碱性较弱,只可使黄酮母 核上酸性较强的酚OH(7-OH)解离而使UV谱?红 移。 熔 融:碱性?,呈现出与NaOMe相同的结果。 78 诊断试剂正在组织测定中的运用 3. NaOAc/H3BO3:确定邻二酚OH。 正在醋酸钠碱性下,邻二酚OH与硼酸络合,惹起峰 带红移。 79 诊断试剂正在组织测定中的运用 4. AlCl3 5. AlCl3 /HCl: 分子中有3-OH,5-OH,邻二酚OH时,可与Al3+络合,引 起吸取峰红移。 铝络合物安闲性: 黄酮醇3-OH > 黄酮5-OH > 二氢黄酮5-OH> 邻二酚 OH 80 诊断试剂正在组织测定中的运用 黄酮或黄酮醇 a. AlCl3/HCl与MeOH中光谱比拟 相像时,信誉娱乐平台示无3-OH或5-OH 分歧时,唯有5-OH,无3-OH时,带Ⅰ红移35-55nm 同时有5-OH,3-OH时,带Ⅰ红移50-60nm 唯有3-OH,带Ⅰ红移60nm b. AlCl3/HCl与AlCl3中光谱比拟 相像时,示无邻二酚羟基 分歧时,B环有邻二酚羟基,带Ⅰ红移35-55nm A,B环有邻二酚羟基,带Ⅰ红移50-60nm 81 诊断试剂对黄酮类化合物UV谱图的影响及组织的闭连 诊断试剂 带II 带I 红移40-60nm, 强度不降 归属 示有4’-OH 示有3-OH, 但无4’-OH 示有对碱敏锐的庖代体例 示有7-OH NaOCH3 红移50-60nm, 强度低浸 吸取谱随光阴延伸而没落 NaOAc (未熔融) 红移5-20nm 正在长波一侧有 明明肩峰 红移40-65nm 强度低浸 示有4’-OH,但无3或7-OH 示有4’-OH 示有对碱敏锐的庖代体例 82 NaOAc (熔融) 吸取谱随光阴延伸而没落 诊断试剂对黄酮类化合物UV谱图的影响及组织的闭连 诊断试剂 带II 红移5-10nm 红移12-30nm AlCl3/HCl谱图 = AlCl3谱图 AlCl3/HCl谱图 ≠ AlCl3谱图 带I或Ia紫移30-40nm AlCl3及 AlCl3/HC l 带I或Ia紫移50-65nm 带I 归属 示A环有邻二酚羟基,但不包罗 5,6-二羟基 示B环有邻二酚羟基 示组织中无邻二酚羟基 示组织中大概有邻二酚羟基 示B环有邻二酚羟基 示A、B环上均有邻二酚羟基 NaOAc/ H3BO3 AlCl3/HCl谱图 = CH3OH谱图 AlCl3/HCl谱图 ≠ CH3OH谱图 带I红移35-55nm 带I红移60nm 带I红移50-60nm 带I红移17-20nm 示无3-或5-OH 示大概有3-或5-OH 示唯有5-OH 示唯有3-OH 示大概同时有3-和5-OH 83 除5-OH外,又有6-含氧庖代 三、黄酮类化合物的1HNMR谱特点 A环质 子信号 B环质 子信号 C环质子 信号 氢核磁共振根蒂学问 常用溶剂的质子的化 学位移值 6—8.5 3.8 特点质子化学位移 2.1 10.5—12 9—10 4.6—5.9 8 7 6 5 4 3 2 0.9 1 0 13 12 11 10 9 H3C-C RCOOH R H CR2=CH-R Ar-O-CH3 RCHO 85 氢核磁共振正在黄酮类组织说明中的运用 常用溶剂: CDCl3、DMSO-d6、C5H5N; 当用DMSO-d6 时: 5-OH: δ12.40; 7-OH: δ 10.93; 3-OH: δ 9.70。 到场D2O互换后,OH信号消散。 86 黄酮类C环1H-NMR谱 C环 黄酮及异黄酮 O O 3 H O H 2 O H-2常举动单峰 显露正在较低场区 δ 7.6-7.8 (1H, s, CDCl3) δ8.5-8.7 (1H, s, DMSO-d6) H-3常举动一个敏锐的单 峰信号显露正在δ6.3处, 常会与H-6或H-8 相混,应留意区别 87 黄酮类C环1H NMR实例 奥洛波尔 异黄酮 88 黄酮类C环1H NMR 二氢黄酮 H-2 δ 5.2 (1H, dd, Jtrans=11.5, Jcis=5.0 Hz) H-3 δ 2.8 (1H, dd, J=17.0Hz, J=11.5Hz) (1H, dd, J=17.0Hz, J=5.0Hz) 89 黄酮类C环1H NMR 二氢黄酮醇 2 O H 3 O H OR 2S,3S 二氢黄酮 二氢黄酮 醇3-O糖 醇 苷 4.8-5.0, d, 5.0-5.6, d, H-2 J=11Hz J=11Hz 4.1-4.3, d, 4.3-4.6 , d, H-3 J=11Hz J=11Hz 90 黄酮类C环1H NMR 查耳酮及橙酮 H ? ? H O C H O O H-α 6.7-7.4 (1H, d, J=17.0Hz) H-β 7.0-7.7 (1H, d, J=17.0Hz) 苄氢 6.5-6.7 (1H, s, CDCl3) 6.4-6.9 (1H, s, DMSO-d6) 91 黄酮类化合物1H-NMR谱 A环 5,7-二庖代黄酮 H-6 H-8 6.3-6.5, d 6-H δ 5.7-6.9 (d, J = 2.5 Hz) 8-H δ 5.7-6.9 (d, J = 2.5 Hz) 6-H信号总比8-H高场 黄酮、黄酮醇、 异黄酮 6.0-6.2, d 上述化合物7O-糖苷 二氢黄酮、二 氢黄酮醇 上述化合物7O-糖苷 6.2-6.4, d 5.7-6.0, d 6.5-6.9, d 5.9-6.1, d 5.9-6.1, d 6.1-6.4, d 92 黄酮类化合物1H-NMR谱 A环 7-庖代黄酮 5-H 7.9-8.2 (d, J = 9.0 Hz) 6-H δ6.7-7.1 (dd, J=9.0, 2.5 Hz) 8-H δ 6.7-7.0 (d, J = 2.5 Hz) H-5:较低场 (受羰基的负屏障效应) 黄酮、黄酮 二氢黄酮、 醇、异黄酮 二氢黄酮醇 H-5 H-6 H-8 7.9-8.2, d 6.7-7.1, dd 6.7-7.0, d 7.7-7.9, d 6.4-6.5, dd 6.3-6.4, d 93 黄酮类化合物1H-NMR谱 B环 4’-庖代黄酮 H-2’,6’: ?7.1-8.1,d, J=8Hz H-3’,5’: ?6.5-7.1,d, J=8Hz C环对H-2’,6’的去屏障效应 94 黄酮类化合物1H-NMR谱 B环 3’,4’-庖代黄酮 H-2’ 黄酮类3’,4’-OH 及3’-OH,4’-OMe 黄酮醇类3’,4’OH及3’-OH,4’OMe 黄酮醇类3’OMe,4’-OH 7.2-7.3, d 7.5-7.7, d 7.6-7.8, d 7.2-7.5, d H-6’ 7.3-7.5, dd 7.6-7.9, dd 7.4-7.6, dd 7.3-7.7, dd 看待黄酮与黄酮醇 H-5’举动一个二重峰 (d, J=8.5 Hz)显露正在6.7-7.1处 H-2’(d, J=2.5 Hz)显露正在7.2及 H-6’(dd, J=8.5, 2.5Hz) 信号显露正在7.9 黄酮醇类3’,4’OH,3-O-糖 异黄酮、二氢黄酮及二氢异黄酮 H-2’,5’,6’举动一个众重峰显露正在 6.7-7.1 95 二氢黄酮 黄酮类化合物1H-NMR谱 B环 3’,4’,5’-庖代黄酮 若3 位和5 位庖代基相像时,H2 , H-6 举动一个单峰,显露正在δ 6.50 ~7.50。 若3 位和5 位庖代基不相像时, H-2 , H-6 将以分歧的化学位移阔别 举动二重峰显露,J=2.0Hz。 97 黄酮类化合物1H-NMR谱 糖 糖上H-1‘’ 黄酮醇3-O-鼠李糖苷 黄酮醇3-O-葡萄糖苷 黄酮类7-O-葡萄糖苷 5.0-5.1 5.7-6.0 黄酮类4’-O-葡萄糖苷 4.8-5.2 黄酮类5-O-葡萄糖苷 黄酮类6-及8-C-糖苷 二氢黄酮醇3-O-葡萄糖苷 二氢黄酮醇3-O-鼠李糖苷 4.1-4.3 4.0-4.2 98 黄酮类化合物1H NMR OH OH HO 7 5 OH O 3 OH O 其他庖代基 甲基 乙酰氧基 甲氧基 δ5-OH: ≈12 ppm δ7-OH: ≈11 ppm δ3-OH: ≈10 ppm H-CH3 2.04-2.45 (3H,s) 2.30-2.45 (3H,s) 3.45-4.10 (3H,s) 99 13C-NMR正在黄酮类化合物组织判决中的运用 骨架类型 苷化位移 黄酮类化合物庖代图式 100 101 质谱正在黄酮类化合物判决中的运用 举措:EI-MS(电子轰击质谱)、FD-MS(场解吸质 谱)、FAB-MS(疾原子轰击质谱) 苷元:EI-MS可取得分子离子峰(强, 往往为基峰); 苷:用FD-MS、FAB-MS或将甙作成甲基化或三甲基 硅醚化衍生物,再测EI-MS。 103 EI-MS裂解次序 裂解途径I RDA裂解 厉重碎片离子峰为裂解途径I 形成的A1和B1 及裂解途径II形成的 [B2]+ 母核确定 A、B-环庖代情形确定 O +. O +. or C HC + C O O M +. A1 +. m/z 120 +. B 1 m/z 102 104 EI-MS裂解次序 裂解途径II O B A A + O C CH +O + C B O + B2 平常,上述两种根本裂解途径是彼此竞赛、彼此限制的。而且, 途径I裂解形成的碎片离子品貌大致与途径II裂解形成的碎片离子的丰 度互成反比。 105 ? 黄酮类: 以裂解途径Ⅰ为主 M+常为基峰、厉重碎片为A1+·、B1+·,中等强度 [M-CO]+、[A1-CO]+也较超过 O A O +. B O A C O +. +. + HC C B M+. 化 合 物 黄酮 5,7-二羟基黄酮 5,7,4’-三羟基黄酮 5,7-二羟基,4’-甲氧基黄酮 A1+. A1+· 120 152 152 152 B1+. B1 +· 102 102 118 132 ? 黄酮醇类:以裂解途径Ⅱ为主 M+常为基峰、厉重碎片为B2+ 、[B2-CO]+ 尚有[A1+ H]+ O I C OH+ A OH O +. M+. m/z 238 B2 m/z 105 +. II B C O O A B A1 + H m/z 121 Thank you !


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